产品信息

产品简介

CRISPR相关蛋白Cas9已经广泛应用于基因组编辑，相比于Cas9蛋白，Cas12a具有类似的基因组编辑效率，但具有较低的脱靶效率，在基因治疗应用中具有巨大的潜力。

不同于Cas9蛋白，Cas12a不需要tracrRNA，只需要单个由41-44nt核苷酸组成的crRNA引导。与Cas9需要富含G的PAM相反，Cas12a-crRNA复合物通过识别富含T（5'-TTTN-3'）的PAM基序来切割靶DNA。Cas12a执行剪切后的DNA双链断裂引入了4或5个核苷酸突出的粘性末端。

本制品来源于Lachnospiraceae bacterium，在蛋白两端分别加了核定位信号（NLS），当Cas12a 以NLS序列表达时，Cas12a-RNP复合体可以在进入细胞后立即定位到细胞核。无需体内转录或翻译，提高了该方法在质粒系统上的效率。另外，本产品还具有一种trans切割的活力，即一旦靶标dsDNA、crRNA和Cas12a蛋白形成三元复合体时，特异性切割靶标dsDNA的同时，会非特异切割体系中其他的ssDNA。这促使Cas12a可以作为一种新型的基因检测和成像的工具。

产品特点：

1) 纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰；

2) 可显著降低脱靶效应。

产品用途：

1) 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；

2) 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；

3) sgRNA 剪切靶点DNA 效率检测，降低体内筛选成本；

4) 体外剪切靶DNA的特异位点。

保存温度：

-20℃保存。

应用实例：

图例）Cas12a Nuclease做DNA片段体外切割活性检测。

带有靶位点的DNA片段约为1500bp，酶切后的片段为1000bp和500bp。

For research use only.