一般描述
ES细胞表征试剂盒由用于碱性磷酸酶活性测定的两个组分以及进行100次测试(包括对照)所需的四种ES细胞特异性抗体组成。
引言
干细胞最近已成为广泛研究的主题,部分原因是它们的治疗潜力以及它们提出了有关增殖和分化调控的几个基本问题。
胚胎干(ES)细胞衍生自早期哺乳动物胚胎的全能细胞,并且能够在体外无限、未分化地增殖[Evans and Kaufman, 1981; Martin, 1981; Morrison, 1997]。 未分化的小鼠ES细胞可在含有细胞因子白血病抑制因子(LIF)或CHEMICON′s专有ES细胞培养试剂ESGRO®的培养基中维持较长时间[Smith,1988;Williams,1988]。 但是,在体外从培养基中去除LIF后,小鼠ES细胞开始分化为源自所有三种细菌层的细胞。 相反,人ES培养需要小鼠成纤维细胞作为饲养细胞,不能用LIF维持自我更新[Thomson and Marshall, 1998; Shamblott, 1988]。
胚胎干细胞的未分化状态的特征在于碱性磷酸酶(AP)[Pease,1990]和干细胞转录因子Oct-4的高水平表达。 然而,这些ES细胞在其阶段特异性胚胎抗原(SSEA)的表达方面也表现出与鼠类对应物的显著差异,所述阶段特异性胚胎抗原代表未分化的人类ES和胚胎癌(EC)细胞。
SSEA-1是一种碳水化合物抗原,是2型聚乳糖胺的岩藻糖基化衍生物,出现在小鼠胚胎的卵裂后期。 它在未分化的鼠ES细胞中强烈表达 [Solter and Knowles, 1978; Gooi, 1981]。 在分化后,鼠ES细胞的特征在于SSEA-1表达的丧失,并且在某些情况下可能伴随着SSEA-3和SSEA-4的出现[Solter,1979]。 相反,人ES和EC细胞通常表达SSEA-3和SSEA-4,但不表达SSEA-1,而它们的分化特征在于SSEA-3和SSEA-4的下调和SSEA-1的上调 [Andrews, 1984; Fenderson and Andrews; 1987]。 未分化的人ES细胞也表达硫酸角蛋白相关抗原,TRA-1-60和TRA-1-81 [Andrews and Banting, 1984]。
CHEMICON′s ESES细胞表征试剂盒(目录号SCR001)是一种特异性和灵敏的工具,可通过测量其AP活性,细胞表面阶段特异性抗原(SSEA-1,SSEA-4)以及TRA-1-60,TRA-1-81抗原的表达来对ES细胞的分化状态进行表型评估。
应用
研究类别
干细胞研究
胚胎干细胞表征试剂盒通过测量ES细胞的AP活性,细胞表面阶段特异性抗原(SSEA-1,SSEA-4)以及TRA-1-60,TRA-1-81抗原的表达,从表型上评估ES细胞的分化状态。
组分
快速红色紫罗兰色溶液(0.8 g/L储存液)(产品号90239)。一个15 mL瓶。
在AMPD缓冲液(pH 9.5;2 mol/L)中的Napthol AS-BI磷酸盐溶液(4 mg/mL)(部件号90234)。一个15 mL瓶。
MS X SSEA-1,IgM,克隆MC-480(部件号90230)。一小瓶包含100μl 1mg/mL单克隆抗体。
MS X SSEA-4,IgG,克隆MC-813-70(部件号90231)。一小瓶含100μL 1mg/mL单克隆抗体。
MS X TRA-1-60,IgM,克隆TRA-1-60(部件号90232)。一小瓶包含100μl 1mg/mL单克隆抗体
MS X TRA-1-81,IgM,克隆TRA-1-81(部件号:90233)。一小瓶含有100μL 1mg/mL单克隆抗体。
储存及稳定性
当存储在2-8o C,试剂盒的组分可在有效期内一直保持稳定。 请勿冷冻或暴露在高温下。到期后,请丢弃所有剩余的试剂。
法律信息
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
ESGRO is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免责声明
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