产品描述

GV3101菌株为C58型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因Rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pMP90(pTiC58DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pMP90(pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pMP90(pTiC58DT-DNA)型Ti质粒含有筛选标签Gent，赋予GV3101菌株庆大霉素抗性，适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作，本公司生产的GV3101化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301质粒(KanR)检测转化效率≥ 104 cfu/μg DNA。

产品优势

? 高转化效率：>1×104 cfu/μg

产品组分

|基因型：C58 (RifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (GentR) Nopaline

产品应用

GV3101菌株适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。

实验流程

1. 将感受态细胞从-80℃中取出，在手心或室温片刻使其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中；

2. 每100 μL感受态加入0.01-1 μg待转化的质粒DNA(加入质粒DNA体积不超过10 μL)，用手轻轻拨打管底混匀，依次于冰上静置10 min、液氮5min (或-70℃干冰乙醇浴 5 min)、37℃水浴 5 min、冰浴5 min；

3. 加入900 μL无抗生素的YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。

4. 6000 rpm，1 min离心收菌，留底部100 μL左右菌液轻轻吹打重悬菌块，涂布于含相应抗生素的YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2~3天(当平板只含有50 μg/mL Kan时，28℃培养48 h即可；平板中同时加入50 μg/mL Kan，20 μg/mL Rif时，需28℃培养60 h；如果使用的平板含有50 μg/mL Rif时，则需要28℃培养72~90 h)。

保存条件

-80℃保存；请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

相关参数