基于焦球菌(PfAgo)的生物传感方法由于其内置的信号放大功能而被广泛探索。然而,PfAgo是一种DNA引导的DNA内切酶的特性使得几乎所有现有的基于PfAgo的报告都可以用于核酸的检测。为了将PfAgo工具箱用于扩展的非核酸检测,华中农业大学食品科学与技术学院Zhengzhang Huang等人系统地研究了PfAgo对引导DNA (gDNA)偏好的机制特征,并提出了一种gDNA去磷酸化调节的PfAgo传感器用于检测非核酸靶点。
研究结果表明,在PfAgo与gDNA浓度的特定比例下,PfAgo对5'-磷酸化的gDNA表现出偏好。利用PfAgo的这种偏好和碱性磷酸酶(ALP)的去磷酸化活性,可以检测到低至2.7 U/L的ALP。此外,将PfAgo与免疫标记的ALP偶联,构建了基于PfAgo的荧光免疫传感器,实现了黄曲霉毒素B1的检测,检测限为29.89 pg/mL,在小麦和玉米样品中具有令人满意的回收率。该方法拓宽了PfAgo工具箱的应用范围,为多种靶标提供了一个简单、灵敏、通用的检测平台。
方案1。图示基于pfago的AFB1检测免疫传感器。(A)探究PfAgo对gDNA 5末端的磷酸化偏好。(B)基于pfago的AFB1免疫传感器检测机制。
